猴B病毒通用核酸检测体系的建立与评价

• 作者: 刘兴友 章金刚 范瑞 贾俊婷 钟亚迪 马丽敏 马玉媛
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猴B病毒 实时荧光定量PCR 核酸检测
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 22-27
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.1
• 字数: 4436字
• 语种: 中文

摘要

建立能同时检测猴B病毒5种基因型的通用核酸检测体系,并对其进行方法学评价.首先,对猴B病毒5种基因型代表毒株全序列进行比对,选取其保守区域(gB基因)设计猴B病毒的通用引物和探针.其次,构建参考品质粒,并以其为模板建立核酸检测体系的标准曲线.最后,对该核酸检测体系分别进行特异性、通用性、敏感性和重复性评价.建立的标准曲线在3×107~3×102copies模板范围内相关系数|r|=0.999.方法学评价结果显示,该核酸检测体系与人单纯疱疹病毒1型、人单纯疱疹病毒2型、水痘带状疱疹病毒、EB病毒、巨细胞病毒均无交叉反应;可同时检测猴B病毒5种基因型,检测下限为30 copies;批内和批间实验重复性良好.建立的猴B病毒通用核酸检测体系对于疑似猴B病毒感染病例的辅助诊断,以及高质量实验猴群的建立均有着重要意义.