组蛋白H4第20位赖氨酸突变阻滞细胞周期

• 作者: 张田甜 槐焕想
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: H4K20甲基化 K20M突变 细胞周期阻滞
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 27-31
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4868字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2018.01.008

摘要

目的 研究组蛋白H4第20位赖氨酸突变对细胞可能存在的影响并探究其分子机制,期望寻找作用于该位点的特异性蛋白,比如H4K20me3去甲基化酶.方法 建立能够表达羧基(C)末端带Flag-HA标签的组蛋白H4及其突变体H4K20M(赖氨酸突变为蛋氨酸),H4K20A(赖氨酸突变为丙氨酸)的HeLa S3细胞系.通过病毒感染法获得能够表达目的蛋白的细胞,碘化丙啶(PI)染色后进行流式细胞(FAGS)周期分析.制备单个核小体(mono nucleosome,mono-N),通过免疫共沉淀的方法得到相互作用蛋白复合物成分,银染观察蛋白组分的差异,将差异蛋白条带切割后进行质谱分析.结果 在病毒感染大约72h过表达K20M的HeLa S3细胞表型异常,主要表现为细胞体积和细胞核体积明显增大,并停止生长,不再分裂.FACS结果显示过表达H4K20M的细胞被阻滞在G2/M期,质谱结果表明在过表达K20M的细胞中RBBP4/7的表达量增高.结论 组蛋白H4第20位赖氨酸突变为蛋氨酸会阻滞细胞周期,而这种阻滞很可能由RBBP4/7所引起.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	槐焕想	中国医学科学院基础医学研究所生化系	1	0	0.0	0.0
2	张田甜	中国医学科学院基础医学研究所生化系	2	0	0.0	0.0