人血清淀粉样蛋白A的重组表达及免疫学检测标准品的初步研究

• 作者: 周齐洋 张小燕 朱婷婷 牛英波
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 工学
• 关键词: 血清淀粉样蛋白A 融合表达 可溶性 蛋白纯化 标准物质 稳定性 免疫反应性
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 21-25
• 页数: 5页
• 分类号: TQ93
• 语种: 中文
• DOI: 10.19526/j.cnki.1005-8915.20180105

摘要

构建人SAA1原核表达载体,建立SAA1蛋白大肠杆菌表达条件和纯化工艺,评价重组SAA1蛋白在制备免疫学检测标准物质中的应用前景.采用同源重组的方法构建表达载体,在N端加入6×His和SUMO标签帮助SAA1蛋白的可溶性表达和纯化;在小量体系中评价SUMO-SAA1蛋白的可溶性表达后,用镍亲和柱和阴离子交换层析方法纯化蛋白,用蛋白酶切除SUMO标签后再通过镍亲和柱层析方法获得高纯度人SAA1重组蛋白;用西门子N-Latex SAA试剂评价重组蛋白的免疫反应性和稳定性,并与SAA国际标准物质进行比较研究.结果表明SUMO-SAA1在大肠杆菌中大部分为可溶性表达且表达量高,产物纯度可达90％以上,稳定性良好并与SAA国际标准物质具有类似的免疫反应性.利用SUMO标签的助溶作用,成功在大肠杆菌中表达了人SAA1重组蛋白,该蛋白适合作为制备SAA1免疫检测的参考标准物质的原材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周齐洋		1	0	0.0	0.0
2	张小燕		1	0	0.0	0.0
3	朱婷婷		1	0	0.0	0.0
4	牛英波		2	0	0.0	0.0