慢病毒载体介导HCV受体基因OCLN/CD81转染对树鼩骨髓间充质干细胞的影响

• 作者: 仝品芬 代解杰 匡德宣 孙晓梅 李娜 李明学 王文广 陆彩霞
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: OCLN CD81 树鼩 骨髓间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 700-707
• 页数: 8页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 5853字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2018.06.005

摘要

目的 观察在体外培养条件下,慢病毒载体介导的HCV受体基因OCLN/CD81转染对树鼩骨髓间充质干细胞生物学特性的影响及基因的表达情况.方法 利用本室分离鉴定保存的树鼩BM-MSCs,构建含人OCLN/CD81基因的慢病毒载体,并分别将CD81和OCLN基因转染到BM-MSCs中,荧光倒置显微镜和流式细胞仪检测转染效率,CCK8法检测转染后BM-MSCs的细胞增殖情况,成骨成脂细胞诱导分化检测其多向分化潜能.采用实时荧光定量及WB方法检测HCV受体(OCLN/CD81)基因mRNA和蛋白表达情况和转染后BM-MSCs干性基因的表达.结果 以MOI为100转染含人OCLN/CD81基因的慢病毒载体后,LV-CD81转染效率达99.4％,LV-OCLN转染效率22.6％.细胞增殖趋势与未转染基因的BM-MSCs相似,转染后的BM-MSCs仍可以向成骨成脂细胞分化,但能力有所下降.干性基因NANOG mRNA表达增高,差异有显著性(P<0.05),LIN28A mRNA表达下降,差异有显著性(P<0.05).转染后树鼩BM-MSCs能高效表达所转入的外源基因.结论 构建的含人OCLN/CD81基因的慢病毒载体可以成功转染树鼩BM-MSCs,并高效表达所转入的基因,转染后对树鼩BM-MSCs的多向分化潜能有一定的影响.