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摘要:
目的 观察正常成年小鼠耳蜗毛细胞中miR-30b的表达,研究其对靶基因(Dynamin1,DNM1)的调控是否会影响内毛细胞中突触囊泡内吞关键蛋白Dynamin的表达.方法 取正常成年C57小鼠耳蜗基底膜行原位杂交,观察耳蜗毛细胞中miR-30b的表达分布;构建荧光素酶报告基因载体,转染293T细胞,通过荧光素酶活性变化明确DNM1是否为miR-30b的靶基因;通过耳蜗圆窗显微注射过表达miR-30b的腺相关病毒(adenoassociated virus,AAV),14 d后通过real time-PCR检测miR-30b和DNM1的mRNA表达,免疫印迹实验(Western blot)检测Dynamin蛋白表达.结果 miR-30b在小鼠耳蜗内、外毛细胞胞质和胞核均有表达;miR-30b可抑制DNM1载体的荧光表达(P<0.05),而突变型DNM1载体的荧光表达无抑制作用;转染AAV-miR-30b后miR-30b的相对表达量增高,DNM1和Dynamin蛋白表达降低.结论 miR-30b在小鼠耳蜗内、外毛细胞均有表达;miR-30可以靶向下调DNM1基因从而抑制Dynamin蛋白表达.
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文献信息
篇名 耳蜗毛细胞miR-30b对Dynamin基因靶向调控的研究
来源期刊 四川大学学报(医学版) 学科
关键词 毛细胞 miR-30b DNM1 Dynamin 原位杂交 双荧光素酶报告基因 腺相关病毒
年,卷(期) 2018,(3) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 347-351
页数 5页 分类号
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 袁伟 第三军医大学西南医院耳鼻喉科 57 263 9.0 14.0
2 余菲 第三军医大学西南医院耳鼻喉科 2 3 1.0 1.0
3 唐小林 第三军医大学西南医院耳鼻喉科 2 3 1.0 1.0
4 李洋 第三军医大学西南医院耳鼻喉科 5 54 3.0 5.0
5 李华君 第三军医大学西南医院耳鼻喉科 1 0 0.0 0.0
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毛细胞
miR-30b
DNM1
Dynamin
原位杂交
双荧光素酶报告基因
腺相关病毒
研究起点
研究来源
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期刊影响力
四川大学学报(医学版)
双月刊
1672-173X
51-1644/R
大16开
成都市人民南路三段17号
62-72
1959
chi
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8
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35558
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