蓝氏贾第鞭毛虫核苷二磷酸激酶基因的克隆与表达

• 作者: 专行 杜萌 王丹丹 王云华 袁义雪 郑国侠
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 蓝氏贾第鞭毛虫 核苷二磷酸激酶 克隆 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 190-192,195
• 页数: 4页
• 分类号: R382.213
• 语种: 中文

摘要

以蓝氏贾第鞭毛虫中国C2株基因组DNA为模板,PCR扩增蓝氏贾第鞭虫核苷二磷酸激酶(GlNDPK)基因编码序列,连接至pET28a质粒,转化至大肠埃希菌(Escherichiacoli) JM109,挑取阳性克隆进行鉴定与测序.将pET28a-GlNDPK转化至E.coli BL21 (DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白表达情况.用8 mol/L尿素溶解包涵体并收集上清,镍离子亲和层析进行纯化,蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白的抗原性.结果显示,PCR扩增获得了长度约1 200 bp的蓝氏贾第鞭毛虫中国C2株GlNDPK基因编码序列.构建的重组质粒pET28a-GlNDPK经PCR鉴定、单酶切鉴定和测序,结果均与预期相符.SDS-PAGE结果显示,重组蛋白以包涵体的形式表达,相对分子质量(Mr)约为40 000,与预期结果大致一致.Western blotting结果显示,该重组蛋白可被His标签抗体识别.提示获得了蓝氏贾第鞭毛虫中国C2株GlNDPK基因编码序列及其重组表达蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜萌	大连大学医学院	8	8	1.0	2.0
2	郑国侠	大连大学环境与化学工程学院	13	40	4.0	6.0
3	王云华	大连大学医学院	28	37	3.0	4.0
4	王丹丹	大连大学医学院	4	1	1.0	1.0
5	专行	大连大学医学院	3	3	1.0	1.0
6	袁义雪	大连大学医学院	1	1	1.0	1.0