橡胶树HbMVK启动子的克隆与缺失表达分析

• 作者: 刘进平 巩笑笑 张恒 杨翠萍 王丹 胡进 谭玉荣 闫冰玉 高璇
• 来源期刊: 热带生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 橡胶树 橡胶生物合成 MVK基因启动子 启动子缺失分析 GUS染色分析
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 21-30
• 页数: 10页
• 分类号: Q786
• 字数: 4759字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.2018.01.003

摘要

为了研究橡胶MVK基因启动子精细结构及功能,笔者利用PCR技术对橡胶树HbMVK基因启动子进行了克隆,并对其进行了生物信息学分析.结果表明,该启动子序列全长1 696 bp,包含CAAT-box,TATA-box,CAT-box,LTR,GARE-motif,TCA-element等元件.此外,根据元件分布,构建橡胶树HbMVK基因启动子系列缺失和全长序列表达载体并转化拟南芥.T2代转基因拟南芥中,报告基因GUS组织化学染色结果表明:HbMVK启动子全长序列和5'端-1 386 bp缺失,HbMVK启动子驱动的GUS基因只在转基因拟南芥实生苗胚轴中有极微弱表达.5'端-1 221 bp和-725 bp缺失,HbMVK启动子驱动GUS基因表达的活性较强,而5'端-325bp缺失,HbMVK启动子则完全失去活性,这表明启动子核心调控元件位于-725 bp到-325 bp之间.