启动子探针载体的构建及橡胶树白粉菌启动子筛选鉴定

• 作者: M.J.N.Rajaofera 何其光 刘文波 刘耀 廖小淼 徐良向 林春花 王义 缪卫国
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 橡胶树白粉菌 启动子 探针载体
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 51-57
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0584

摘要

旨在构建适于快速检测橡胶树白粉病菌(Oidium heveae)HO-73启动子的探针载体.以卡那霉素抗性基因Kan作为报告基因,在pUC19骨架载体,构建获得启动子探针载体pUC19-K,连入CaMV35S启动子做启动子探针载体功能验证;利用启动子探针载体pUC19-K对预测的启动子片段LY1、LY2、LY3、LY4进行筛选鉴定.将CaMV35S启动子连入到启动子探针载体中,得到可检测启动子活性的启动子探针载体pUC19-K;应用生物信息学软件对部分橡胶树白粉菌HO-73全基因组数据预测,得到4个理论上具有活性的启动子序列LY1、LY2、LY3、LY4,利用构建的启动子活性探针载体进行活性比较,卡那耐受性实验检测发现含LY2和LY3的菌株随卡那霉素浓度的升高耐受性更强,最终得到2个活性较强的启动子LY2和LY3.以上结果表明,构建的启动子活性探针载体可以有效、灵敏地用于HO-73强启动子的筛选和启动子活性检测.