永生化绵羊肺成纤维细胞系的构建及鉴定

• 作者: 刘光清 刘腾 张莉 朱杰 缪秋红 董丹丹
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊肺成纤维细胞 人端粒酶逆转录酶 永生化
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 其他
• 页码范围: 54-58
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.3
• 字数: 4213字
• 语种: 中文

摘要

为了利用携带人源端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的慢病毒表达系统将原代绵羊肺成纤维细胞进行永生化.本研究利用PCR技术从pBabe-neo-hTERT中扩增hTERT基因,并利用infusion技术构建重组慢病毒表达载体pLOV-puro-hTERT.将重组慢病毒三质粒系统共转染293T细胞,拯救出慢病毒颗粒并感染原代绵羊肺成纤维细胞,经嘌呤霉素抗性筛选获得阳性克隆,分别应用RT-PCR和Western blot方法检测传代细胞系中hTERT基因的转录和表达水平.筛选获得的阳性克隆,命名为SLT细胞系.SLT细胞系连续传代后RT-PCR及Western blot 检测均显示hTERT稳定表达.本研究表明,我们成功构建了永生化绵羊肺成纤维细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘光清	中国农业科学院上海兽医研究所	54	461	9.0	20.0
2	张莉	中国农业科学院上海兽医研究所	190	1101	14.0	26.0
3	董丹丹	中国农业科学院上海兽医研究所	6	27	3.0	5.0
4	朱杰	中国农业科学院上海兽医研究所	14	13	3.0	3.0
5	缪秋红	中国农业科学院上海兽医研究所	12	18	3.0	3.0
6	刘腾	中国农业科学院上海兽医研究所	6	14	3.0	3.0