百合AGPase基因RNAi载体构建及遗传转化研究

• 作者: 刘挺燕 孙嘉曼 张进忠 李朝生 范燕萍
• 来源期刊: 西南农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 百合 AGPase基因 RNA干扰 载体构建 遗传转化
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源
• 页码范围: 1097-1103
• 页数: 7页
• 分类号: Q812
• 字数: 5532字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2018.6.001

摘要

[目的]AGPase基因可在百合鳞茎膨大发育过程中影响淀粉的合成代谢,从而调控鳞茎发育,构建干扰AGPase基因RNAi载体并遗传转化进行反向下调作用研究,可为该调控机制的研究提供更多信息.[方法]克隆300 bp的AGPase基因保守序列,利用Gateway技术通过BP反应将该序列插入入门载体pDONR221,进行LR反应将该序列正反向插入干扰载体pJawohl8-RNAi中,经过酶切鉴定所构建RNAi载体的正确性;并通过农杆菌介导法转入百合组培苗中,PCR检测RNAi载体转化农杆菌,荧光定量PCR检测农杆菌转化植株的AGPase相对表达量变化.[结果]成功构建pDONR221-AGPase入门克隆与pJawohl8-RNAi-AGPase表达载体,遗传转化百合愈伤诱导出AGPase表达量下调的转化植株.[结论]采用Gateway技术可方便构建RNAi表达载体,选择的AGPase保守序列能作为干扰片段对百合AGPase自身转录的mRNA进行下调.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张进忠	华南农业大学林学与风景园林学院	35	234	8.0	14.0
3	李朝生	广西农业科学院生物技术研究所	28	138	7.0	10.0
4	孙嘉曼		11	40	4.0	5.0
7	范燕萍	华南农业大学林学与风景园林学院	40	636	15.0	24.0
8	刘挺燕	广西农业科学院生物技术研究所	1	0	0.0	0.0