TIE2-R849W突变斑马鱼模型的建立及其在静脉畸形发病中的作用探讨

• 作者: 张凌 杜仲 王延安 郑家伟 马海龙
• 来源期刊: 中国口腔颌面外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 静脉畸形 尾静脉丛 斑马鱼 Egfl7
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-11
• 页数: 6页
• 分类号: R543.6
• 语种: 中文
• DOI: 10.19438/j.cjoms.2018.01.002

摘要

目的:建立TIE2-R849W突变斑马鱼模型并初步探讨其在静脉畸形中可能的致病机制.方法:通过合成TIE2-R849W突变基因表达体系,利用成熟的mRNA显微注射技术,基于flila:EGFP转基因斑马鱼构建TIE2-R849W过表达斑马鱼模型,荧光显微镜下记录斑马鱼尾静脉丛(caudal vein plexus,CVP)的早期发育改变并定量比较.提取斑马鱼RNA,针对目标基因行实时定量PCR(qRT-PCR),利用已有基因芯片进一步验证结论.采用GraphPad Prism 5.0进行统计学分析.结果:基于对TIE2-R849W过表达斑马鱼模型的观察,TIE2-R849W显著影响斑马鱼早期尾静脉丛的发育,表现为尾静脉丛窦腔数量和面积显著减少.qRT-PCR显示,TIE2-R894W可引发pik3r2 foxo1b的表达上调,而与尾静脉丛发育相关的基因,除显著高表达的egfl7外,nr2f2、nr2f1a和s1pr1均无显著异常表达.比较体外芯片结果,部分突变组内的tie2、pik3r2、oxo16及egft7同样存在一致的高表达.结论:TIE2-R849W引发斑马鱼尾静脉丛发育异常与egfl7的高表达关系密切.