利用CRISPR/Cas9构建斑马鱼tbx20基因突变体及其功能分析

• 作者: 朱哲 李伟明 祖尧 胡沛男
• 来源期刊: 上海海洋大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: tbx20 斑马鱼 心脏发育 腔室分化 CRISPR/Cas9
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 水产生物技术
• 页码范围: 1-9
• 页数: 9页
• 分类号: S917
• 语种: 中文
• DOI: 10.12024/jsou.20180502308

摘要

转录因子TBX20在脊椎动物心脏的腔室发育和维护中起至关重要的作用.利用CRISPR/Cas9系统成功制备了斑马鱼tbx20突变鱼系,T7E1检测结果显示F0敲除效率平均为42.1％,测序分析F1中突变种质遗传效率为36.7％.F2突变体中观察到心脏突变表型:48 hpf,心包腔肿大,静脉窦瘀血,环化异常,心脏结构变形;3 dpf,心脏畸形拉伸成线状结构.原位杂交和qRT-PCR结果显示,突变体中vmhc表达上调,amhc和myl7表达下调.成功制备了斑马鱼tbx20突变体,结果表明tbx20纯合突变体心脏畸形,环化受到影响,为深入探究tbx20在早期心脏腔室分化过程中的作用奠定了基础.