抗小鼠移码因子1蛋白多抗制备及其在脂肪细胞分化中的表达

• 作者: 关亚群 帕孜丽耶·亚森 朱建强 梁小弟 王珺怡 袁新 贾德政
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 脂肪细胞分化 上游移码因子1 无义介导的mRNA降解 抗体制备
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 335-339
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 字数: 3090字
• 语种: 中文

摘要

目的 制备小鼠上游移码因子1(UPF1)蛋白多克隆抗体并探讨脂肪细胞分化过程中UPF1蛋白的表达.方法 构建UPF1蛋白表达载体,制备并纯化兔抗小鼠UPF1抗体;诱导3T3-L1细胞分化,并用免疫共沉淀(CoIP)方法观察脂肪细胞分化过程中UPF1蛋白的表达.结果 1)制备了效价≥64万且与重组mUPF1蛋白和天然mUPF1蛋白均有很强的特异性结合能力的兔抗小鼠UPF1的多克隆抗体;2)小鼠3T3-L1细胞成脂诱导过程中UPF1蛋白表达量未发生明显变化;3)脂肪细胞分化过程中UPF1蛋白与UPF2蛋白相互作用增加.结论 1)以mUPF1蛋白C端550个氨基酸为抗原制备的抗体能够有效识别mUPF1蛋白;2)在脂肪细胞分化过程中UPF1蛋白与UPF2蛋白互作增强.