脂肪分化相关蛋白通过抑制中性胆固醇酯水解酶表达促进RAW264.7细胞内脂质积蓄

• 作者: 孟磊 张瑞 袁中华 袁旭 陈雁斌
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脂肪分化相关蛋白 中性胆固醇酯水解酶 蛋白激酶Cδ 动脉粥样硬化
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 115-121
• 页数: 7页
• 分类号: R363
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨RAW264.7巨噬细胞中脂肪分化相关蛋白(adipophilin)调控中性胆固醇酯水解酶(nCEH)表达进而介导脂质积蓄的作用机制.方法 用已成功构建的沉默与高表达Adipophilin的逆转录病毒质粒载体转染包装细胞PA317,继而收集病毒液感染RAW264.7巨噬细胞,筛选出Adipophilin沉默细胞株和高表达细胞株.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹分析技术(Western blot)分别检测nCEH的mRNA和蛋白表达水平,液体闪烁计数仪、高效液相色谱法检测细胞内胆固醇流出及胆固醇酯含量.结果 ①高表达Adipophilin的细胞组胆固醇、胆固醇酯含量明显高于空白对照组(P＜0.01),而沉默Adipophilin表达的细胞组则显著低于空白对照组(P＜0.01),Adipophilin可抑制nCEH mRNA和蛋白的表达.②用100 nmol/L蛋白激酶Cδ(PKCδ)激动剂佛波酯(PMA)孵育高表达Adipophilin的RAW264.7细胞30 min后,nCEH的mRNA与蛋白表达水平明显降低(P＜0.05),而用100 nmol/L PKCδ抑制剂卡马拉素(Rottlerin)同样孵育30 min后,nCEH的表达水平较对照组增高(P＜0.05).结论 Adipophilin促进巨噬细胞内脂质积蓄可能通过抑制nCEH表达来实现,在这一调控机制中PKCδ发挥了重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁中华	南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室	38	348	11.0	17.0
2	陈雁斌		20	60	5.0	7.0
3	袁旭	南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室	3	11	1.0	3.0
4	孟磊	南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室	4	21	2.0	4.0
5	张瑞	南华大学心血管疾病研究所动脉硬化学湖南省重点实验室	4	11	1.0	3.0