基于RNA-Seq技术探讨洋参芎芍方改善RAW264.7巨噬细胞代谢及炎症反应的机制

• 作者: 王红芹 徐凤芹 周庆兵 刘玥 梅俊 刘晓林 刘藜 张颖 中国中医科学院西苑医院
• 来源期刊: 中西医结合心脑血管病杂志
• 关键词: 糖尿病 动脉粥样硬化 益气活血方 巨噬细胞 糖脂代谢 过氧化物酶体增殖物激活受体-gamma, PPAR-γ 实验研究
• 年，卷（期）: 2024,（14）
• 所属期刊栏目: 基础医学论著/研究
• 页码范围: 56-63
• 页数: 8页
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨洋参芎芍方对RAW264.7巨噬细胞代谢、炎症反应的影响及其可能的机制。方法:应用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测RAW264.7巨噬细胞活性；分别使用葡萄糖、总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)试剂盒检测巨噬细胞葡萄糖摄取率、TC、FC;酶联免疫吸附法(ELISA)检测RAW264.7巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平；油红O染色法检测RAW264.7巨噬细胞脂质积聚；真核RNA测序(RNA-seq)技术检测RAW264.7巨噬细胞基因表达，通过蛋白免疫印迹法(Westren Blot)检测洋参芎芍方对RAW264.7巨噬细胞过氧化物酶体增殖物激活受体-gamma(PPAR-γ)蛋白表达的影响。结果:与空白组比较，洋参芎芍方在25～6 400 mg/L梯度范围内均促进RAW264.7巨噬细胞的活性(P<0.01);与空白组比较，模型组可增加RAW264.7巨噬细胞的葡萄糖摄取率、TC与FC浓度、TNF-α水平及脂质积聚(P<0.05),与模型组比较，洋参芎芍中剂量组、高剂量组可减少RAW264.7巨噬细胞葡萄糖摄取率、TC与FC浓度、TNF-α水平及脂质积聚(P<0.05);RNA测序结果表明过PPAR-γ信号通路是调控巨噬细胞代谢的关键通路，洋参芎芍方(400 mg/mL)可降低PPAR-γ蛋白表达，Westren Blot结果显示模型组PPAR-γ蛋白表达降低，洋参芎芍方可增加PPAR-γ蛋白表达(P<0.05)。结论:洋参芎芍方可能通过增加PPAR-γ蛋白表达改善巨噬细胞代谢及炎症反应。