鸭梨PAL基因的反义遗传转化及表达分析

• 作者: 李会宣 许冬倩 闫洪波
• 来源期刊: 广西植物
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭梨 苯丙氨酸解氨酶 反义RNA 遗传转化 基因表达
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 植物生理与育种
• 页码范围: 492-500
• 页数: 9页
• 分类号: Q943.2|S772.3|S661.2
• 字数: 6297字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11931/guihaia.gxzw201705005

摘要

苯丙氨酸解氨酶(phenylalanin ammonia?lyase,PAL,EC4.3.1.5)是植物通过苯丙烷代谢途径合成木质素的关键酶和限速酶,其通过影响木质素的合成而与果实中石细胞的分化、发育及果实品质密切相关.为了降低鸭梨中苯丙氨酸解氨酶的含量,该研究利用反义PAL基因遗传转化鸭梨、降低鸭梨内源PAL基因的表达.结果表明:(1)采用RT?PCR技术,利用根据GenBank中西洋梨PAL基因序列设计特异性引物,扩增得到496 bp的鸭梨PAL基因片段.(2)将扩增片段反向插入载体pBI121的MCS区域,构建植物PAL基因反义表达载体pBI121?AsPAL.接着采用电转化法将反义表达载体转入农杆菌EHA105中,并制备出农杆菌工程菌液.(3)利用农杆菌介导法对鸭梨组培苗叶片外植体进行遗传转化,得到23株转基因鸭梨苗.PCR检测证实PAL反义基因片段转入鸭梨中,实时定量PCR检测表明转基因鸭梨苗体内PAL基因表达量均有所降低,为非转基因苗的65%~75%.该研究结果表明利用反义RNA技术获得了抑制内源性PAL基因表达的转基因鸭梨植株,为改善鸭梨果实品质、改良品种奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李会宣	河北经贸大学生物科学与工程学院	15	73	5.0	8.0
2	闫洪波	河北经贸大学生物科学与工程学院	22	51	4.0	5.0
3	许冬倩	河北经贸大学生物科学与工程学院	12	60	4.0	7.0