搭载小鼠IL-33重组溶瘤病毒的构建及其对肿瘤协同抑制作用的研究

• 作者: 冯超 商冰雪 沈辉 盛晗
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 溶瘤病毒 白细胞介素33 转基因技术 T细胞 抗肿瘤作用
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 652-657
• 页数: 6页
• 字数: 5217字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2018.09.002

摘要

目的 构建重组溶瘤病毒vvmIL33,靶向感染肿瘤细胞后能稳定分泌小鼠IL-33蛋白(mIL-33),同时研究观察其对肿瘤的协同抑制作用.方法 采用PCR法扩增小鼠IL-33基因序列,将其插入真核表达载体中构建pCMS1-mIL33重组子;脂质体法将重组子导入已被亲本溶瘤病毒(vJS6)感染的细胞内,重组获得重组溶瘤病毒vvmIL33,经流式分选、纯化重组溶瘤病毒;酶联免疫吸附法(ELISA)检测vvmIL33感染肿瘤细胞后培养上清中mIL-33蛋白的含量;重组溶瘤病毒vvmIL33和亲本病毒vJS6分别感染肿瘤细胞,通过空斑形成试验和MTS试剂盒分别检测溶瘤病毒的复制能力及其对肿瘤细胞的溶解能力;经T细胞共培养实验观察vvmIL33感染肿瘤细胞后诱导T细胞的抗肿瘤能力.结果 重组子pCMS1-mIL33酶切电泳结果表明成功插入了mIL-33基因;与对照组相比,vvmIL33感染MC38细胞后能高剂量稳定分泌mIL-33蛋白;空斑形成试验结果显示vvmIL33或vJS6感染CV1、MC38细胞在各个时间点产生相似量的病毒,差异无统计学意义(P>0.05);不同感染复数下(MOI),vvmIL33感染后对肿瘤细胞的溶解能力与vJS6相似,差异无统计学意义(P>0.05);经T细胞共培养实验后发现,相比较vJS6组,vvmIL33感染MC38细胞组中T细胞所产生的INF-γ蛋白浓度明显升高(P<0.05),同时诱导T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用也明显增强(P<0.05).结论 成功构建了重组溶瘤病毒vvmIL33,mIL-33的表达不损害溶瘤病毒的复制能力和诱导杀肿瘤细胞溶解的能力,溶瘤病毒搭载mIL-33增强了T细胞的免疫效应,增加了抗肿瘤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈辉	嘉兴市第一医院中心实验室	4	9	1.0	3.0
2	盛晗	嘉兴市第一医院护理部	5	9	1.0	3.0
3	冯超	苏州大学转化医学研究院	3	0	0.0	0.0
4	商冰雪	苏州大学转化医学研究院	2	0	0.0	0.0