卷叶贝母MCT基因克隆与表达分析

• 作者: 张甜甜 李锐 赵琦 陈晓仪
• 来源期刊: 分子植物育种
• 关键词: 川贝母 2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸胱氨酰转移酶 克隆 生物信息学 基因表达
• 年，卷（期）: 2018,（22）
• 所属期刊栏目: 基因组学及功能基因
• 页码范围: 7275-7280
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13271/j.mpb.016.007275

摘要

本研究是基于转录组测序结果,通过PCR技术克隆卷叶贝母(Fritillaria cirrhosaD.Don)中MEP途径的2-C-甲基-D-赤藓醇-4-磷酸胱氨酰转移酶基因(2-C-methyl-D-erythritol-4-phosphate cytidylyltrans-ferase,MCT)的开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,运用生物信息学方法对该基因进行分析,预测其编码蛋白的结构与功能,并通过荧光定量PCR (qRT-PCR)检测FcMCT基因在野生鳞茎和愈伤组织中的表达情况,为后续卷叶贝母MCT基因功能研究打下基础.通过PCR技术,获得了900 bp的FcMCT ORF片段,编码299个氨基酸,并与NCBI上公布的木薯、橡胶树、向日葵等植物MCT蛋白的相似性达80％以上;通过SOPMA和SWISS-MODE网站预测的FcMCT蛋白的二级、三级结构,可以看出FcMCT蛋白的主要结构元件是无规卷曲和α螺旋构成;通过qRT-PCR检测野生状态的卷叶贝母中根、茎、叶、鳞茎和诱导状态的愈伤组织中的FcMCT基因表达水平,发现在愈伤组织的表达水平最高.最终,我们认为FcMCT是甾类生物碱合成途径的关键酶,在贝母不同组织中的表达量不同,受激素组合诱导表达,FcMCT是一个具有生物学功能的蛋白质,为利用基因工程手段提高卷叶贝母中生物碱含量提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张甜甜		1	0	0.0	0.0
2	李锐		2	0	0.0	0.0
3	陈晓仪		1	0	0.0	0.0
4	赵琦		3	1	1.0	1.0