叶用莴苣LsHsp70-3701基因过表达载体的构建及遗传转化体系的优化

• 作者: 刘然 刘超杰 李雅博 苏振琪 范双喜 郝敬虹 韩莹琰
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 莴苣 过表达载体 农杆菌 遗传转化
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 页码范围: 63-70
• 页数: 8页
• 分类号: S636.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2018.01.08

摘要

为研究叶用莴苣中Hsp70基因的功能,以提高其耐热性,构建LsHsp70-3701过表达载体,农杆菌介导法转化叶用莴苣.从叶用莴苣中克隆得到LsHsp70-3701,利用Nco Ⅰ和Spe Ⅰ双酶切LsHsp70-3701和植物表达载体pCAMBIA1304,回收目的片段并连接,经鉴定后获得过表达载体.以‘P-S11’叶用莴苣为转化材料,针对遗传转化关键因素:苗龄、植物激素浓度、预培养时间、侵染液OD值、侵染时间和共培养时间进行优化.试验结果表明最佳转化条件为:苗龄5d的子叶,6-BA 0.2 mg/L+ NAA 0.1 mg/L,KT质量浓度为0.2 mg/L,OD600为0.3,预培养2d,侵染10 min,共培养2d.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范双喜	北京农学院植物科学技术学院	93	1024	15.0	27.0
2	郝敬虹	北京农学院植物科学技术学院	16	41	4.0	6.0
3	韩莹琰	北京农学院植物科学技术学院	43	360	10.0	17.0
4	刘超杰	北京农学院植物科学技术学院	14	42	4.0	6.0
5	苏振琪	北京农学院植物科学技术学院	1	0	0.0	0.0
6	李雅博	北京农学院植物科学技术学院	8	19	2.0	4.0
7	刘然	北京农学院植物科学技术学院	1	0	0.0	0.0