虹鳟免疫诱导型基因Cathelicidin2启动子功能分析

• 作者: 徐鹏 江炎亮 白庆利 蒋立坤 许建 赵紫霞 陈葆华
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 虹鳟 抗菌肽 Cathelicidin2 启动子 转录调控
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 37-45
• 页数: 9页
• 分类号: Q812|S917.4
• 字数: 6279字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19663/j.issn2095-9869.20170614001

摘要

本研究通过实时荧光定量PCR实验对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)Cathelicidin2(Cath2)基因的转录模式进行了分析.结果显示,该基因在鳃、头肾等与机体免疫防御功能密切相关的组织内转录,在细菌和病毒感染后,转录水平均显著升高.对基因上游调控序列进行启动子和转录因子结合位点预测,发现该启动子具有真核生物典型的TATA盒和CAAT盒结构,基因上游直至第一内含子区域内,密集存在多个免疫相关转录因子结合位点,其中,2个核因子κB(Nuclear factor kappa B,NFκB)预测结合位点均位于核心启动子正链区域.在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肾组织细胞系内,绿色荧光蛋白和萤火虫荧光素酶基因都能够在该启动子驱动下表达,表明其具有启动子活性,且启动子活性在受到免疫诱导后增强,包括细菌脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)模拟的细菌感染和聚肌胞苷酸(Polyinosinic polycytidylic acid,Poly I:C)模拟的病毒感染.双荧光素酶报告基因检测显示,启动子活性在与NFκB转录因子表达时,增强至4.39倍,证明Cath2基因受NFκB通路调控.研究表明,虹鳟Cath2基因能够在多种免疫刺激诱导下表达,其启动子可以应用为免疫诱导型的基因工程元件,驱动外源免疫基因在鱼体内适时表达,抵御外界病原感染,同时,避免非必要条件下的过度表达形成生长负担.