人源多能干细胞体外定向诱导分化为肝细胞

• 作者: 余江南 徐希明 杜盼
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人源诱导多能干细胞 肝细胞诱导 体外分化 三维支架
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 39-46
• 页数: 8页
• 分类号: R329.2
• 字数: 5470字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13312/j.issn.1671-7783.y170159

摘要

目的:探索人源诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)在体外二维条件下诱导分化生成肝细胞的条件,并初步探讨三维条件下hiPSCs的肝细胞诱导分化.方法:通过测定4种诱导培养基中白蛋白和甲胎蛋白含量,筛选诱导分化的最佳方案.用筛选出的最优培养基对hiPSCs进行二维培养,采用免疫荧光法、蛋白质印迹法检测诱导后的细胞中肝脏标志蛋白的表达,采用酶联免疫吸附法检测肝细胞功能相关蛋白的含量;对hiPSCs进行三维培养,用酶联免疫吸附法对比二维与三维条件下肝细胞功能,并用HE染色法观察三维条件下形成细胞的形态.结果:二维条件下诱导分化23 d,倒置显微镜下细胞呈典型的肝细胞形态;免疫荧光法、蛋白质印迹法检测到诱导分化后的细胞阳性表达肝脏特征蛋白(甲胎蛋白、白蛋白、角蛋白CK8、角蛋白CK18、SOX17),且与胚胎干细胞来源肝细胞(hESCs-HEPs)内含量相近;酶联免疫吸附法测定结果显示,诱导形成的肝细胞具有正常肝细胞功能,表明hiPSCs已分化为肝细胞;HE染色结果显示三维条件下诱导形成的细胞具有明显双核,呈现典型肝细胞形态;酶联免疫法测定结果显示,三维条件下,诱导形成的肝细胞功能没有受到损伤,仍具有正常肝细胞功能.结论:在二维与三维培养体系下,采用最佳诱导分化方案,hiPSCs能够被诱导分化为肝细胞,且表达肝脏相关蛋白,并具有正常肝细胞功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余江南	江苏大学药学院	65	631	14.0	23.0
2	徐希明	江苏大学药学院	75	695	14.0	23.0
3	杜盼	江苏大学药学院	3	3	1.0	1.0