融合TAT重组猪细小病毒样粒子的构建及鉴定

• 作者: 刘金凤 吴健敏 张振江 杜毅超 白安斌 覃绍敏 陈凤莲
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 重组杆状病毒 TAT蛋白转导域,病毒样粒子
• 年，卷（期）: 2018,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 66-71
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4771字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2018.12.013

摘要

为表达和鉴定含TAT蛋白转导域的重组猪细小病毒(PPV)样粒子,以PPV N株为模板扩增其VP2基因,将具有穿膜功能的TAT蛋白转导域连接在VP2基因的N端,构建TAT-VP2融合基因,并用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统构建含TAT-VP2基因的重组杆状病毒,感染昆虫细胞进行融合基因的表达,通过间接免疫荧光(IFA)、电镜观察及血凝试验对表达产物进行鉴定.IFA结果显示细胞表达产物能与鼠抗PPV抗体发生特异性反应,透射电镜观察到表达产物可装配形成典型的病毒样粒子结构,形态大小与野生型PPV及VP2病毒粒子相似;血凝试验证实融合TAT重组PPV-VLPs具有与全病毒相同的血凝活性.试验结果为进一步研制高效PPV亚单位疫苗奠定了基础.