抗传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 刘红亮 周景明 张改平 王爱萍 祁艳华 耿玥 马文利
• 来源期刊: 郑州大学学报（理学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性支气管炎病毒 N蛋白 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 基础科学与工程技术
• 页码范围: 75-79
• 页数: 5页
• 分类号: S858.31
• 字数: 3243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13705/j.issn.1671-6841.2018176

摘要

将IBV H120毒株通过接种鸡胚的方法扩繁,从含病毒的尿囊液中提取总RNA,RT-PCR扩增N基因,构建原核表达载体pGEX-6p-1-N.将测序正确的重组质粒转化入E.coli Transetta(DE3)感受态,对重组蛋白进行诱导表达并纯化,切除GST标签.采用纯化的N蛋白制备抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫效果最好的小鼠B淋巴细胞与SP2/0细胞进行融合.利用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,经过3次亚克隆筛选出13株单抗,其中8株能与IBV结合.通过体内诱生腹水的方法对1A12C5细胞株进行大量制备,辛酸/硫酸铵方法对腹水进行纯化并鉴定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王爱萍	郑州大学生命科学学院	48	183	8.0	11.0
2	张改平	郑州大学生命科学学院	20	40	4.0	6.0
3	周景明	郑州大学生命科学学院	33	141	7.0	10.0
4	祁艳华	郑州大学生命科学学院	26	56	5.0	6.0
5	刘红亮	郑州大学生命科学学院	8	11	3.0	3.0
6	耿玥	郑州大学生命科学学院	3	5	2.0	2.0
7	马文利	郑州大学生命科学学院	2	3	1.0	1.0