施氏假单胞菌固氮调控蛋白NifA调节电子传递体rnf1基因簇的表达

• 作者: 刘伟 张维 战嵛华 燕永亮 陆伟 陆超 黄义
• 来源期刊: 中国农业科技导报
• 学科: 生物学
• 关键词: 生物固氮 电子传递体基因簇 NifA蛋白 凝胶阻滞试验
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 生物技术 生命科学
• 页码范围: 39-45
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13304/j.nykjdb.2018.0217

摘要

施氏假单胞菌A1501中电子传递体基因簇rnf1位于固氮基因岛上,该基因簇的突变造成固氮酶活显著下降.在rnf1基因簇的启动子区含有固氮调控蛋白NifA的保守结合序列,实时定量qRT-PCR分析证实了nifA突变株中rnf1基因簇的表达量与野生型相比急剧下调,暗示着NifA直接参与rnf1基因簇的表达调控.细菌单杂交系统的体内互作实验表明,在大肠杆菌体内NifA与rnf1基因簇启动子存在直接相互作用;进一步的凝胶阻滞试验证明原核表达纯化的NifA蛋白与rnf1基因簇启动子序列存在体外直接结合.上述结果从分子水平上给出了两者间相互作用的直接证据,为深入研究联合固氮基因的表达调控网络奠定了基础.