MALAT-1沉默对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡及Caspase-3通路的影响

• 作者: 张建华 徐晓刚 肖宜 韩旭
• 来源期刊: 临床和实验医学杂志
• 关键词: 口腔鳞状细胞癌 肺癌转移相关转录本-1 半胱天冬蛋白酶-3 细胞增殖 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 225-229
• 页数: 5页
• 字数: 5611字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-4695.2018.03.001

摘要

目的 探究RNA干扰技术(RNAi)沉默肺癌转移相关转录本-1(MALAT-1)基因对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡的影响并探讨其作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MALAT-1在人正常口腔上皮细胞系HIOE和OSCC细胞系SCC25中的表达情况.实验分为四组:空白对照组不转染序列;阴性对照组采用对照序列进行转染;RNAi组采用MALAT-1SiRNA进行转染;inhibitor组在SiRNA转染SCC25细胞前30 min,向培养基中加入Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO进行预处理(终浓度为40 μmol/L).采用RNAi技术敲低SCC25细胞中MALAT-1表达,采用透射电子显微镜(TEM)观察SCC25细胞超微结构;采用CKK-8法检测细胞增殖情况;采用流式膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素碘化丙啶(AnnexinV-FITC/PI)法检测细胞凋亡情况;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(WB)检测Caspase-3 mRNA和蛋白表达情况.结果 与正常细胞比较,MALAT-1在人OSCC细胞系SCC25中表达上调,差异有统计学意义(P <0.05).转染MALAT-1 SiRNA可明显降低SCC25细胞中MALAT-1表达(P <0.05).与阴性对照组和空白对照组比较,RNAi组SCC25细胞增殖抑制率明显升高,细胞凋亡明显增加,差异均有统计学意义(P <0.05);细胞呈现出典型的凋亡特征;细胞中Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平均升高(P <0.05).加入Caspase-3抑制剂预处理,细胞凋亡明显减弱(P <0.05).结论 MALAT-1沉默抑制人OSCC细胞系SCC25细胞增殖,促进凋亡,推测可能通过Caspase-3凋亡通路发挥作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张建华	上海市长海医院眼科	2	13	2.0	2.0
2	肖宜	上海市长海医院口腔科	1	5	1.0	1.0
3	韩旭	上海市长海医院口腔科	1	5	1.0	1.0
4	徐晓刚	上海市长海医院口腔科	1	5	1.0	1.0