水稻类受体蛋白激酶FTPK1的原核表达及其活性检测

• 作者: 刘炜 李臻 李颖秀 潘教文 王庆国
• 来源期刊: 山东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻 类受体蛋白激酶 FTPK1 原核表达 蛋白纯化 激酶活力检测
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术· 遗传育种· 种质资源
• 页码范围: 7-13
• 页数: 7页
• 分类号: S511.0353
• 字数: 4832字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14083/j.issn.1001-4942.2018.05.002

摘要

类受体蛋白激酶(receptor-like kinase,RLKs)是植物信号分子的受体,它能够通过胞内激酶域对底物进行磷酸化或去磷酸化,从而对下游靶基因的转录及表达进行调控,参与胞内信号转导,在植物生长发育及环境应答过程中发挥作用.本研究以水稻"中花11"cDNA为模板,通过PCR技术获得类受体蛋白激酶基因FTPK1的全长序列,进一步构建原核表达载体pET-28a-FTPK1后,经1 mmol/L IPTG诱导12 h,获得88 kD的诱导表达蛋白条带,显示FTPK1可在大肠杆菌中诱导表达.表达产物经Ni柱纯化及透析后,获得纯化的融合蛋白.FTPK1激酶活力检测显示,其可磷酸化蛋白底物His和MBP,具有一定的磷酸化活性.本研究为进一步制备FTPK1特异性抗体,深入解析其理化特性及生物学功能奠定了基础.