CRISPR/Cas9技术编辑新疆甜瓜全缘叶基因

• 作者: 李冠 王丹 王旭辉 高兴旺
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 甜瓜 全缘叶基因 PLL CRISPR/Cas9 潮霉素
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 页码范围: 238-245
• 页数: 8页
• 分类号: S188|S652
• 字数: 5774字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2018.02.005

摘要

[目的]以新疆甜瓜地方品种老汉瓜为研究材料,对其全缘叶基因进行基因编辑,构建新疆甜瓜CRISPR/Cas9敲除载体,分析甜瓜耐受潮霉素最大浓度,为研究新疆甜瓜裂叶基因的功能奠定基础.[方法]在课题组前期确定甜瓜全缘叶基因PLL的基础上,结合甜瓜基因组数据,设计PLL基因外显子的特异靶位点,构建甜瓜全缘叶基因PLL的CRISPR/Cas9敲除载体,将构建好的载体转化到大肠杆菌中,并测序验证,然后对甜瓜耐受潮霉素浓度进行分析.[结果]针对全缘叶基因PLL外显子选择一个长约20 bp的靶位点,根据靶位点设计sgRNA框,并成功将其构建到CRISPR/Cas9敲除载体上,然后将载体成功转化到大肠杆菌中.分析出甜瓜可耐受潮霉素的最大浓度为10 mg/L.[结论]成功获得甜瓜全缘叶基因PLL的敲除载体,并转化到大肠杆菌中.分析出甜瓜耐受潮霉素的最大浓度,为进一步利用CRISPR/Cas9基因编辑技术研究新疆甜瓜裂叶基因pll的功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李冠	新疆大学生物工程研究中心	125	1244	20.0	27.0
2	王旭辉	新疆大学生物工程研究中心	12	47	4.0	6.0
4	高兴旺	新疆大学生物工程研究中心	17	115	6.0	10.0
7	王丹	新疆大学生物工程研究中心	10	15	2.0	3.0