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摘要:
成肌细胞(myoblast)具有自我更新和多向分化的能力,对骨骼肌的再生和修复起着重要作用.为了建立奶山羊(Capra hircus)肌细胞的体外分离纯化、培养和鉴定的方法,了解其增殖和成肌特性,为奶山羊肌肉发育调控机理研究提供实验材料,本研究采集西农萨能奶山羊羔羊骨骼肌组织,采用Ⅰ型胶原酶和胰酶两步酶消化法分离细胞,结合差速贴壁纯化得到成肌细胞,利用qRT-PCR和免疫荧光染色法对分离纯化后的成肌细胞进行进一步鉴定.细胞形态学观察结果显示,分离纯化后的成肌细胞呈梭形,生长状态良好;qRT-PCR和免疫荧光染色结果显示,生肌调节因子5(myogenic regulatory factor5,Myf5)和成肌决定因子(myogenic differentiation factor,MyoD)、结蛋白(desmin)呈阳性表达,纯化后的成肌细胞纯度大于95%;诱导分化后的成肌细胞能够相互融合形成肌管,成肌特异性标志蛋白肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MYHC)呈阳性表达.本研究建立了奶山羊成肌细胞体外分离培养的方法,并成功获得了高纯度的具有增殖和成肌特性的成肌细胞,可用于奶山羊肌肉发育调控研究.
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文献信息
篇名 奶山羊成肌细胞体外分离培养及鉴定
来源期刊 农业生物技术学报 学科 农学
关键词 奶山羊 成肌细胞 分离 鉴定
年,卷(期) 2018,(11) 所属期刊栏目 研究资源与技术改进
研究方向 页码范围 1996-2002
页数 7页 分类号 S827
字数 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-7968.2018.11.019
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 罗军 西北农林科技大学动物科技学院 91 625 13.0 20.0
2 王平 西北农林科技大学动物科技学院 22 122 6.0 10.0
3 吕明 西北农林科技大学动物科技学院 5 28 2.0 5.0
4 石恒波 浙江理工大学生命科学学院 2 6 1.0 2.0
5 田慧彬 西北农林科技大学动物科技学院 3 4 1.0 2.0
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1993
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