奶山羊成肌细胞体外分离培养及鉴定

• 作者: 吕明 王平 田慧彬 石恒波 罗军
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 奶山羊 成肌细胞 分离 鉴定
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 1996-2002
• 页数: 7页
• 分类号: S827
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2018.11.019

摘要

成肌细胞(myoblast)具有自我更新和多向分化的能力,对骨骼肌的再生和修复起着重要作用.为了建立奶山羊(Capra hircus)肌细胞的体外分离纯化、培养和鉴定的方法,了解其增殖和成肌特性,为奶山羊肌肉发育调控机理研究提供实验材料,本研究采集西农萨能奶山羊羔羊骨骼肌组织,采用Ⅰ型胶原酶和胰酶两步酶消化法分离细胞,结合差速贴壁纯化得到成肌细胞,利用qRT-PCR和免疫荧光染色法对分离纯化后的成肌细胞进行进一步鉴定.细胞形态学观察结果显示,分离纯化后的成肌细胞呈梭形,生长状态良好;qRT-PCR和免疫荧光染色结果显示,生肌调节因子5(myogenic regulatory factor5,Myf5)和成肌决定因子(myogenic differentiation factor,MyoD)、结蛋白(desmin)呈阳性表达,纯化后的成肌细胞纯度大于95％;诱导分化后的成肌细胞能够相互融合形成肌管,成肌特异性标志蛋白肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MYHC)呈阳性表达.本研究建立了奶山羊成肌细胞体外分离培养的方法,并成功获得了高纯度的具有增殖和成肌特性的成肌细胞,可用于奶山羊肌肉发育调控研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗军	西北农林科技大学动物科技学院	91	625	13.0	20.0
2	王平	西北农林科技大学动物科技学院	22	122	6.0	10.0
3	吕明	西北农林科技大学动物科技学院	5	28	2.0	5.0
4	石恒波	浙江理工大学生命科学学院	2	6	1.0	2.0
5	田慧彬	西北农林科技大学动物科技学院	3	4	1.0	2.0