肉鸡成肌细胞的分离培养与鉴定

• 作者: 姜润深 张成 王孝成 王驰 耿照玉 赵菲 陈凯凯
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 肉鸡 成肌细胞 鉴定 培养温度 成肌诱导分化
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 页码范围: 72-79
• 页数: 8页
• 分类号: S831.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2020.09.08

摘要

为建立肉鸡成肌细胞的体外分离、培养及鉴定体系,选取11d鸡胚为材料,利用Ⅰ型胶原酶消化鸡胚胸肌,差速贴壁法分离纯化成肌细胞,优化成肌细胞培养条件;通过细胞形态学观察和成肌分化标志基因表达情况进行细胞鉴定,并利用含2％马血清的培养基诱导其成肌分化.结果 表明:分离获得的细胞贴壁后呈纺锤形,39.5℃培养条件下细胞增殖速度显著高于37.0℃(P＜0.05);经实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测分析,增殖期与分化期均有成肌细胞的特异性标志基因成肌因子5 (Myogenic factor 5,My f5)与成肌分化因子1(Myogenic differentiation 1,MyoD)的表达,且与增殖期相比,成肌细胞分化期肌细胞生成素(Myogenin,MyoG)与肌肉调节因子4(Muscle regulatory factor,MRF4)基因表达量显著升高(P＜0.05);此外,细胞增殖期结蛋白(Desmin)和分化期肌球蛋白重链(Myosin heavy chain,MyHC)呈阳性表达.综上,成功分离获得了肉鸡成肌细胞,并在39.5℃培养条件下具有更好的增殖能力,为研究肌肉发育及其营养调控机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	耿照玉	安徽农业大学动物科技学院	96	590	13.0	19.0
2	姜润深	安徽农业大学动物科技学院	64	383	11.0	16.0
3	王驰	安徽农业大学动物科技学院	4	1	1.0	1.0
4	张成	安徽农业大学动物科技学院	6	17	2.0	4.0
5	陈凯凯	安徽农业大学动物科技学院	2	0	0.0	0.0
6	赵菲	安徽农业大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0
7	王孝成	安徽农业大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0