丹酚酸C对Mpp+损伤的SH-SY5Y细胞氧化应激和凋亡的抑制作用

• 作者: 周启蒙 宋俊科 张雪 张雯 杜冠华 杨海光 王金华
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 丹酚酸C SH-SY5Y细胞 活性氧 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 392-399
• 页数: 8页
• 分类号: R963
• 字数: 4143字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2018.05.007

摘要

目的 研究丹酚酸C对Mpp+诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用.方法 SH-SY5Y细胞与丹酚酸C(0.1,1.0和5.0 μmol·L-1)或阳性药N-乙酰半胱氨酸(NAC)5 mmol·L-1孵育2h后加入MPP+ 500 μmol·L-1,继续培养24 h.MTT法检测细胞存活率,AO/EB染色观察细胞形态及凋亡,应用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,线粒体超氧化物指示剂(MitoSOX)特异性探针检测线粒体超氧化物水平,JC-1检测线粒体膜电位,免疫荧光法测定NADPH氧化酶2(NOX2)的表达,免疫荧光和Western蛋白质印迹法检测细胞色素c,Bcl-2,Bax和活化的胱天蛋白酶3的表达水平.结果 MPP+ 500 μmol· L-1损伤导致细胞存活率显著降低(P＜0.01),丹酚酸C(1.0和5.0 μmol· L-1)及NAC(5 mmol·L-1)能够逆转Mpp+损伤,显著提高细胞存活率(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).丹酚酸C(1.0和5.0 μmol· L-1)能够显著减少Mpp+诱导的细胞总ROS增加(P＜0.01),维持Bax/Bcl-2表达平衡(P＜0.01),减缓线粒体膜电位降低(P＜O.05,P＜0.01),减少细胞色素c的释放(P＜0.01)及胱天蛋白酶3的活化(P＜0.05,P＜0.01).同时,丹酚酸C(0.1,1.0和5.0 μmol· L-1)能够明显抑制NOX2的表达(P＜0.01),降低线粒体内超氧化物水平(P＜0.01),改善Mpp+引起的细胞氧化应激状态.结论 丹酚酸C能够抑制Mpp+诱发的SH-SY5Y细胞氧化应激及其介导的细胞凋亡.