1,4苯醌对K562细胞自噬的影响及机制

• 作者: 孙凤梅 张娟 张虹 浦跃朴 章梦莹
• 来源期刊: 环境与职业医学
• 学科: 医学
• 关键词: 自噬 1,4苯醌 K562细胞 LY294002 氯喹
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 原创精选
• 页码范围: 411-417
• 页数: 7页
• 分类号: R137
• 语种: 中文
• DOI: 10.13213/j.cnki.jeom.2018.17564

摘要

[目的]研究1,4苯醌(1,4-BQ)对人慢性髓系白血病K562细胞自噬的影响及其机制.[方法]选择人慢性髓系白血病K562细胞,采用1,4-BQ、自噬早期抑制剂LY294002和自噬晚期抑制剂氯喹(CQ)进行染毒处理,分为对照组、1,4-BQ染毒组(5、10、20μmol/L)、LY294002组(10μmol/L)、CQ组(10 μmol/L)、1,4-BQ(20 μmol/L)+LY294002(10 μmol/L)组和1,4-BQ(20 μmol/L)+CQ(10μmol/L)组.应用MTT法检测细胞增殖率;采用CYTO-ID荧光探针并运用荧光染色法和流式细胞术法对细胞自噬水平进行定性、定量检测;采用、丫啶橙染色法检测细胞溶酶体pH值;运用实时定量PCR法和Western blot法检测LC3-Ⅱ和P62自噬相关基因和蛋白的表达水平.[结果] 10、20 μtrnol/L的1,4-BQ分别作用K562细胞24、48、72h后,细胞相对增殖率明显降低(P＜0.05).CYTO-ID自噬荧光染料特异性聚集在K562细胞胞质内,随着染毒浓度增加荧光强度明显增强.流式细胞术结果显示,与对照组相比,5、10、20 μtmol/L 1,4-BQ组自噬水平均明显增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).、丫啶橙染色结果显示,不同浓度1,4-BQ组红色荧光强度均高于对照组,即1,4-BQ组溶酶体pH明显降低.Western blot结果显示,当1,4-BQ浓度为10、20 μmol/L时,LC3-Ⅱ和P62蛋白表达量明显高于对照组(P＜0.05),且在染毒24h时增幅最大.干预自噬后,与1,4-BQ组相比,1,4-BQ+LY294002组的自噬水平和LC3-Ⅱ蛋白表达量均降低(P＜0.05).与1,4-BQ组相比,1,4-BQ+CQ组自噬水平增加(P＜0.05),而与CQ组的差异无统计学意义.此外,与对照组相比,CQ组LC3-Ⅱ蛋白表达明显增加(P＜0.05).与1,4-BQ组相比,1,4-BQ+CQ组LC3-Ⅱ蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).[结论]1,4-BQ可引起K562细胞LC3-Ⅱ、P62蛋白表达增加,可能是通过增加自噬体的合成和减少自噬体的降解从而增加细胞自噬.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	浦跃朴	东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室	176	2029	25.0	35.0
2	孙凤梅	东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室	3	14	2.0	3.0
3	张娟	东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室	77	187	7.0	11.0
4	张虹	东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室	9	24	3.0	4.0
5	章梦莹	东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室	2	2	1.0	1.0