检测创伤弧菌两种毒力基因的环介导等温扩增检测方法的建立

• 作者: 凌娇 别闯南 李恭贺 王权 白雪瑞 蒋蔚
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 环介导等温扩增 溶血素A基因 多重毒素 创伤弧菌
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 寄生虫
• 页码范围: 48-54
• 页数: 7页
• 分类号: S852.613
• 字数: 3695字
• 语种: 中文

摘要

为建立快速检测致病性创伤弧菌两种毒素的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法,分别以创伤弧菌溶血素A基因(hemolysin gene A,HA)和多重毒素(repeats in toxin,RTX)毒力基因的保守序列作为靶序列设计内、外引物.通过肉眼观察白色沉淀初步判断检测结果,通过琼脂糖电泳最终确定检测结果.LAMP检测创伤弧菌的两种基因的灵敏度都达到10 CFU/mL.特异性结果表明致病性创伤弧菌的结果为阳性,而其他几种常见弧菌和食源菌检测结果为阴性.在人工模拟样品检测中,LAMP结果显示,采用水煮法提取DNA,从样品处理到报告结果耗时1.5 h,鱼肉中创伤弧菌的检出限为1×102CFU/g(RTX)和1×104CFU/ g(HA);采用同样方法提取 DNA进行普通PCR,其检出限为1×103CFU/g(RTX)和1×104CFU/ g(HA),耗时4 h.结果表明,本研究建立的LAMP方法检测创伤弧菌两种毒力基因时具有灵敏度高、特异性强、方法简便等优点,适用于食品和养殖业中的现场快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王权	中国农业科学院上海兽医研究所	65	346	11.0	15.0
2	李恭贺		24	105	6.0	8.0
3	蒋蔚	中国农业科学院上海兽医研究所	25	104	6.0	9.0
4	白雪瑞	中国农业科学院上海兽医研究所	6	21	2.0	4.0
5	凌娇	中国农业科学院上海兽医研究所	4	8	2.0	2.0
6	别闯南		1	2	1.0	1.0