蝉花蛋白提取方法比较

• 作者: 刘腾飞 刘自尧 史新元 史晓飒 张洪梅
• 来源期刊: 山东中医药大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 蝉花 蛋白提取 抗肿瘤
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 中药研究
• 页码范围: 457-461
• 页数: 5页
• 分类号: R248.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.16294/j.cnki.1007-659x.2018.05.021

摘要

目的:比较不同方法所提蝉花蛋白的浓度、数量和体外抗肿瘤活性,筛选最适蝉花蛋白提取方法.方法:采用六种方法提取蝉花中的总蛋白质,分别为Tris-HCl/饱和酚法(A法)、TCA/丙酮沉淀法(B法)、两步法(C法)、蜗牛酶酶解法(D法)、Tris-HC1提取法(E法)、磷酸盐缓冲液(PBS)提取法(F法),通过蛋白质浓度检测、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析及体外抗人乳腺癌细胞(MCF-7)肿瘤活性检测,比较不同提取方法对蛋白提取效果的影响.结果:从提取浓度来看,A法最优;从SDS-PAGE结果看,A法和B法即蛋白质沉淀法效果较好,条带丰度好且较清晰,C法条带丰度较好,但较模糊;从蛋白体外抗肿瘤活性结果看,C法、E法、F法的蛋白活性较高.结论:方法A、B、C均适用于蝉花总蛋白的提取,但方法A、B在制备过程中无法保持蝉花蛋白的生物活性,而方法C即两步法提取的蝉花蛋白浓度较高、种类较多,体外抗MCF-7肿瘤活性也较强,为蝉花蛋白提取最适方法.