下调miR-92a通过调控PIAS3抑制ox-LDL诱导RAW264.7细胞炎症介质分泌和脂质蓄积

• 作者: 刘智芬 胡威威 陈丽曼
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RAW264.7细胞 氧化型低密度脂蛋白 miR-92a 炎症介质 脂质蓄积
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1119-1126
• 页数: 8页
• 分类号: R363
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2018.11.009

摘要

目的 探讨下调miR-92a对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导RAW264.7细胞炎症介质分泌和脂质蓄积的影响及其机制.方法 以不同浓度(0、25、50、100 mg/L)的ox-LDL处理RAW264.7细胞24 h或以100 mg/Lox-LDL分别处理RAW264.7细胞0、12、24 h后,采用定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ox-LDL对miR-92a表达的影响.建立miR-92a低表达的RAW264.7细胞株,并给予100 mg/L ox-LDL处理后,用qRT-PCR、油红0染色、一氧化氮(N0)荧光探针(DAF-FMDA)和Western blot检测下调miR-92a表达对ox-LDL诱导的RAW264.7细胞中炎症因子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β表达、脂质蓄积以及信号转导子和转录激活子3(STAT3)信号通路相关蛋白p-STAT3、STAT3蛋白表达的影响.建立活化STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)和miR-92a低表达的RAW264.7细胞株,并给予100 mg/L ox-LDL处理后,观察沉默PIAS3表达对ox-LDL作用下miR-92a低表达的RAW264.7细胞中炎症因子、脂质蓄积以及STAT3信号通路的影响.TargetScan软件预测和双荧光素酶报告实验验证miR-92a和PIAS3的靶向关系.结果 随着ox-LDL作用时间和浓度的增加,RAW264.7细胞中miR-92a表达升高;双荧光素酶报告实验验证PIAS3是miR-92a的靶基因.采用ox-LDL处理后RAW264.7细胞中miR-92a、iNOS、IL-6、IL-1β、p-STAT3表达升高,NO释放增多和细胞内脂滴升高,而PIAS3的表达下降.这种调控作用可被anti-miR-92a所抑制;而沉默PIAS3后,anti-miR-92a的这一抑制作用得以恢复.结论 下调miR-92a可通过调控PIAS3抑制ox-LDL诱导RAW264.7细胞炎症介质分泌和脂质蓄积.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈丽曼	河北医科大学附属哈励逊国际和平医院老年病一科	15	96	6.0	9.0
2	胡威威	河北医科大学附属哈励逊国际和平医院老年病一科	3	0	0.0	0.0
3	刘智芬	河北医科大学附属哈励逊国际和平医院老年病一科	2	0	0.0	0.0