溪黄草和线纹香茶菜的ISSR反应体系的建立与优化

• 作者: 刘军民 孟爽爽 罗登花 袁亚 詹若挺 许睿芝
• 来源期刊: 中药新药与临床药理
• 学科: 医学
• 关键词: 溪黄草 线纹香茶菜 简单重复序列区间 体系优化 遗传多样性
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 中药资源研究
• 页码范围: 652-656
• 页数: 5页
• 分类号: R282.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.19378/j.issn.1003-9783.2018.05.020

摘要

目的 构建溪黄草与线纹香茶菜的简单重复序列区间(inter-simple sequence repeat,ISSR)反应体系,为溪黄草药材种质资源的遗传多样性分析奠定基础.方法 通过设定溪黄草ISSR-PCR的各反应因子的不同梯度,对反应条件进行优化,建立适合溪黄草与线纹香茶菜的ISSR反应体系;以溪黄草DNA为模板,用该体系对100条引物进行初筛,用线纹香茶菜进行复筛,并用23个溪黄草、16个线纹香茶菜单株样品验证体系稳定性.结果 建立了溪黄草和线绞香茶菜ISSR最佳反应体系(25 μL):2×Taq Master Mix 12.5 μL(Mg2+浓度4mmol·L-1,dNTP浓度0.4 mmol·L-1)、引物0.6 μmol·L-1、模板DNA 10 ng.结论 建立的溪黄草和线纹香茶菜的ISSR反应体系稳定可靠、标记位点清晰、检测多态性能力强,可较好地应用于溪黄草与线纹香茶菜的ISSR遗传多样性分析的研究.