CREB和ERK1/2在CaMK Ⅱδ调控破骨细胞分化中的作用

• 作者: 冯晓洁 孙红 戚孟春 李任 王红美 董伟 陆大壮
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 破骨细胞 钙调蛋白依赖性激酶Ⅱδ RNA干扰 cAMP反应原件结合蛋白 细胞外信号调节激酶1/2 活化T细胞核因子c1
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 91-95
• 页数: 5页
• 分类号: R743.31
• 字数: 4313字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2018.02.01

摘要

目的 探索cAMP反应原件结合蛋白(CREB)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)在钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMK Ⅱ)δ调控破骨细胞分化中的作用及分子机制.方法 构建CaMK Ⅱδ RNA干扰载体并转染小鼠RAW264.7细胞,确定其干扰效率.病毒转染细胞后,用50ng/ml核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导,于不同时间点检测CREB、ERK1/2蛋白磷酸化水平.应用ERK1/2信号阻断剂PD98059处理细胞,检测ERK1/2信号阻断对活化T细胞核因子c1(NFATc1)基因表达及破骨细胞分化的影响.结果 CaMK Ⅱδ干扰载体在mRNA和蛋白水平的干扰效率分别为77.2％和70.2％.CaMKⅡδ干扰可明显降低CREB、ERK1/2蛋白磷酸化水平,下调幅度分别为21％～55％和55％～64％.此外,ERK1/2信号阻断明显下调了NFATc1蛋白表达,使破骨细胞数目、骨吸收陷窝数目及面积分别下降了39.3％、50.0％和52.3％.结论 CaMK Ⅱδ RNA干扰可明显抑制CREB和ERK1/2蛋白磷酸化;CREB和ERK1/2参与了CaMK Ⅱδ对破骨细胞分化的调控.