抗RecQ解旋酶单克隆抗体的制备、鉴定及应用

• 作者: 刘杰麟 周孟 廉芳 张荣红 贾铁文
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: RecQ解旋酶 单克隆抗体 制备 鉴定 应用
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 169-174
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11|R392-33|Q813.2|S852.4+3
• 语种: 中文

摘要

目的 制备抗RecQ解旋酶单克隆抗体(mAb),鉴定其生物学特性并开展其对肿瘤细胞中RecQ解旋酶的检测.方法 以纯化鉴定后的重组大肠杆菌RecQ解旋酶免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗RecQ解旋酶mAb.用秋水仙素阻断法对杂交瘤细胞进行染色体核型分析,用间接ELISA检测mAb的免疫球蛋白(Ig)亚型与效价,用Western blot法和荧光偏振技术鉴定mAb的生物学特性,使用间接免疫荧光技术检测mAb与MDA-MB-231乳腺癌细胞中BLM、RecQ4和RecQ5的作用.使用免疫组织化学染色法分析该mAb与K562肿瘤细胞及其干细胞中RecQ解旋酶的结合.结果 获得能稳定分泌抗RecQ解旋酶mAb的杂交瘤细胞株6H5,染色体数目在94 ～ 104,抗体亚型为IgG1型,腹水效价为1×l0-7.该mAb能特异性结合大肠杆菌RecQ解旋酶,抑制其与DNA的结合,并能识别BLM、RecQ4和RecQ5解旋酶,还可敏锐检测K562肿瘤细胞与肿瘤干细胞中RecQ解旋酶的表达.结论 成功制备获得效价高、特异性强的抗RecQ解旋酶mAb.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘杰麟	贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心	14	32	3.0	4.0
5	张荣红	贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心	3	5	1.0	2.0
9	贾铁文	贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心	2	5	1.0	2.0
13	廉芳	贵州医科大学组织工程与干细胞实验中心	1	4	1.0	1.0