斜纹夜蛾信息素结合蛋白SlitPBP4的分子克隆、组织表达谱及结合特性分析

• 作者: 刘乃勇 孙佳斌 李双美 董双林 闫祺
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 斜纹夜蛾 SlitPBP4 组织表达分析 原核表达 荧光竞争结合实验
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 657-667
• 页数: 11页
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2018.06.004

摘要

[目的]鉴定斜纹夜蛾Spodoptera litura新的信息素结合蛋白(pheromone binding protein,PBP)基因,明确其在斜纹夜蛾不同组织中的表达水平并探讨其功能.[方法]基于已报道的烟草天蛾Manduca sexta、家蚕Bombyx mori、君主斑蝶Danaus plexippus和庆网蛱蝶Melitaea cinxia4种非夜蛾科昆虫PBP4同源基因的序列特点及与其他PBP基因在染色体上的相邻关系,通过分析实验室先前克隆到的斜纹夜蛾PBP/GOBP基因序列,克隆斜纹夜蛾PBP4同源基因;通过RT-PCR和qPCR技术测定该基因在斜纹夜蛾雌雄成虫不同组织中的表达水平;利用体外表达和荧光竞争性结合实验测定斜纹夜蛾PBP4蛋白对性信息素组分和植物气味物质的结合能力.[结果]在夜蛾科昆虫斜纹夜蛾中鉴定到首个PBP4基因,命名为SlitPBP4(GenBank登录号:MG356847),cDNA编码210个氨基酸,具有N末端信号肽、疏水性气味分子结合域及6个保守半胱氨酸等PBP的典型序列特征,其基因组DNA在保守位置也含有2个内含子;但和已报道的斜纹夜蛾3个PBP相比,PBP4的C末端明显较长.SlitPBP4在雄成虫腹部(生殖系统)极高表达,在雌雄成虫触角及其他组织中仅微弱表达或不表达.荧光竞争性结合实验结果表明,SlitPBP4蛋白与被测定的信息素组分及植物气味物质均没有明显结合能力.[结论]报道了夜蛾科昆虫的首个PBP4基因,该基因可能主要参与雄虫生殖相关的生理过程而非嗅觉功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董双林	南京农业大学植物保护学院农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室	33	526	14.0	22.0
2	刘乃勇	西南林业大学云南省森林灾害预警与控制重点实验室	10	10	2.0	3.0
3	闫祺	南京农业大学植物保护学院农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室	2	5	1.0	2.0
4	孙佳斌	南京农业大学植物保护学院农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室	1	5	1.0	1.0
5	李双美	南京农业大学植物保护学院农业部作物病虫害监测与防控重点开放实验室	1	5	1.0	1.0