斜纹夜蛾受翻译控制肿瘤蛋白基因的克隆及表达

• 作者: 卢梦玲 徐汉虹 毛根林 闫超
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 斜纹夜蛾 TCTP基因 克隆和表达 序列分析
• 年，卷（期）: 2013,（18）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 3793-3799
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.18.007

摘要

[目的]克隆斜纹夜蛾受翻译控制肿瘤蛋白（TCTP）基因，分析其序列特征，为深入研究该基因奠定基础。[方法]利用RACE末端快速扩增技术，在斜纹夜蛾卵巢细胞中克隆TCTP基因的全长。根据不同物种间TCTP基因的同源性来构建进化树，并在原核细胞中对斜纹夜蛾TCTP进行表达。[结果]克隆得到斜纹夜蛾TCTP基因全长cDNA，登录号为HQ896486.1。序列分析表明，该基因cDNA全长829 bp，开放阅读框长519 bp，编码含172个氨基酸的蛋白，蛋白分子质量19.67 kD。生物信息学分析表明，斜纹夜蛾 TCTP 基因属于受翻译控制肿瘤蛋白家族，与其它物种TCTP基因有很高相似性。构建重组质粒 pET32a(+)-TCTP，在大肠杆菌中表达重组蛋白，确定了1 mmol·L-1 IPTG诱导4 h为重组蛋白表达的最佳条件，在短期内能得到大量稳定性好的TCTP蛋白。[结论]从斜纹夜蛾卵巢细胞中克隆得到斜纹夜蛾 TCTP 基因全长 cDNA，并且成功在原核细胞中进行表达。本研究为深入研究斜纹夜蛾TCTP的功能以及针对斜纹夜蛾TCTP基因RNAi干扰的生物防控提供了理论依据和技术支持。