钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ通过介导凋亡加重 H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤

• 作者: 孔令恒 孙娜 朱娟霞 李美 苏兴利 陈玉龙 魏明
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 受磷蛋白 H9c2细胞 细胞凋亡 缺氧/复氧损伤
• 年，卷（期）: 2018,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1403-1408
• 页数: 6页
• 分类号: R541.4|R363.2
• 字数: 3402字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2018.08.009

摘要

目的:探讨钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)在H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤中的作用.方法:H9c2心肌细胞随机分为4组:正常对照(control)组、CaMKII特异性抑制剂KN-93(1μmol/L)对照(KN-93)组、H/R组和KN-93+H/R组,其中KN-93组及KN-93+H/R组先用1μmol/L KN-93预处理2 h后,再进行其它处理.倒置显微镜观察各组H9c2心肌细胞的形态变化,CCK-8法检测各组H9c2心肌细胞的活力,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测各组培养基中LDH的活性,Western blot法检测CaMKII及其底物受磷蛋白(phospholamban,PLN)的磷酸化水平以及凋亡相关蛋白cleaved caspase-3的表达,TUNEL染色和流式细胞术观察细胞凋亡.结果:与control组相比,KN-93组各项指标均无显著性差异;H/R组细胞皱缩,大量死亡,细胞活力明显降低,培养基中LDH活性明显升高(P<0.01),CaMKII及PLN的磷酸化水平和cleaved caspase-3的蛋白水平显著增加(P<0.01),TUNEL染色阳性细胞数和流式细胞凋亡率显著增加(P<0.01);1μmol/L KN-93干预H/R可明显改善细胞形态,增加细胞活力,降低培养基中LDH活性(P<0.01),减少CaMKⅡ和PLN的磷酸化水平以及cleaved caspase-3的蛋白水平(P<0.05),降低TUNEL染色阳性细胞数和流式细胞凋亡率(P<0.01).结论:CaMKⅡ通过介导细胞凋亡参与H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈玉龙	西安医学院基础与转化医学研究所	10	29	4.0	5.0