杜氏盐藻Ds FA D2基因的鉴定及缺氮胁迫下表达分析

• 作者: 刘宝玲 安茜 宋亚楠 岳敏 李润植 薛金爱 赵熙宁
• 来源期刊: 山西农业大学学报(自然科学版)
• 关键词: 杜氏盐藻(Dunaliellasalina) ω-6脂肪酸去饱和酶2(FAD2) 不饱和脂肪酸 缺氮胁迫
• 年，卷（期）: 2018,（3）
• 所属期刊栏目: 专题:微藻生物技术
• 页码范围: 23-29
• 页数: 7页
• 分类号: Q949.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.13842/j.cnki.issn1671-8151.201712034

摘要

[目的]w-6脂肪酸去饱和酶2(FA D2)催化油酸(18:1)去饱和形成亚油酸(18:2),是多不饱和脂肪酸合成过程中的第一个关键酶.为了探究 DsFA D2在盐藻油脂合成积累中的作用.[方法]本文以运城盐湖分离的富油杜氏盐藻(Dunaliella salina)株系(YC-011)为材料,利用高保真PCR技术克隆盐藻 DsFA D2基因,并对 DsFA D2编码蛋白进行了跨膜区、高级结构及氨基酸序列比对等一系列生物信息学分析.应用qRT-PCR检测 DsFA D2基因在氮(N)胁迫培养条件下的表达模式.[结果]DsFAD2蛋白定位于内质网中,有5个跨膜区,具有典型膜结合蛋白的结构特征.此外,DsFAD2也具有所有FAD2蛋白家族所特有的3个组氨酸保守区和芳香族氨基酸序列.系统发育分析发现杜氏盐藻DsFAD2与莱茵衣藻CrFAD2、团藻VcFAD2亲缘关系最近.qRT-PCR表明,与正常培养的杜氏盐藻相比,缺N培养显著诱导DsFAD2上调表达,N胁迫8 d时DsFAD2的表达量是未胁迫对照的2.8倍.[结论]Ds-FAD2参与杜氏盐藻N胁迫响应,促进多不饱和脂肪酸形成,增强藻细胞抗逆性.本研究为进一步解析N胁迫条件下藻细胞油脂富集及响应分子机制提供了科学参考.