LV-EGFP-inhba过表达慢病毒载体转染大鼠卵巢颗粒细胞的实验研究

• 作者: 方政慧 王继东 罗爽
• 来源期刊: 现代妇产科进展
• 学科: 医学
• 关键词: Activin A 慢病毒载体 转染 颗粒细胞
• 年，卷（期）: 2018,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 418-420,425
• 页数: 4页
• 分类号: R711.75
• 语种: 中文
• DOI: 10.13283/j.cnki.xdfckjz.2018.06.005

摘要

目的:构建inhba基因过表达的慢病毒载体(lenti-EGFP-inhba),观察体外转染大鼠卵巢颗粒细胞的有效性.方法:pLVX-EGFP-3 FLAG质粒系统经EcoRI酶切使之线性化.inhba基因(NM 008380)PCR扩增后同源重组入线性化的表达质粒系统.Western blot法检测表达质粒目的基因表达.将构建成功的慢病毒载体(lenti-EGFP-inhba)转染大鼠卵巢颗粒细胞(MOI=20),检测目的基因表达.结果:PCR扩增产物与目的基因大小吻合,重组质粒系统经转化后获得阳性克隆,转染293 T细胞可见EGFP-inhba融合蛋白表达.Western blot获得76 kDa分子量大小阳性条带,与融合蛋白分子量大小一致.lenti-EGFP-inhba体外转染大鼠卵巢颗粒细胞,倒置荧光显微镜下可见EGFP表达.结论:len-ti-EGFP-inhba表达载体成功构建,并可在体外有效转染大鼠卵巢颗粒细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗爽	遂宁市中心医院妇产科	6	14	1.0	3.0
2	方政慧	山东大学附属济南市中心医院妇科	4	13	1.0	3.0
3	王继东	山东大学附属济南市中心医院妇科	5	16	2.0	4.0