D896N突变型EGFR稳转细胞株的构建及其对吉非替尼敏感性的研究

• 作者: 彭佳 潘婧 潘跃银
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 非小细胞肺癌 EGFR突变 稳定转染
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1327-1331
• 页数: 5页
• 分类号: R734.2
• 字数: 4612字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2018.09.002

摘要

目的 构建携带D896N突变型EGFR基因的重组质粒,转染Ba/F3细胞后对其的表达及对吉非替尼的敏感性进行研究.方法 PCR构建重组质粒MSCV-Tel-EGFR D896N,与2种辅助质粒MLV和VSVG共转染293T细胞包装产生慢病毒,对Ba/F3细胞进行转染.Puromycin筛选后,Western blot检测EGFR及p-EGFR的表达;撤除IL-3培养观察细胞是否正常增殖;Western blot检测并比较Ba/F3-Tel-EGFR L858R、Ba/F3-Tel-EGFR D896N对于吉非替尼的敏感性.结果 酶切及测序验证重组质粒构建无误,Western blot检测转染后的Ba/F3细胞中EGFR及p-EGFR有表达,撤除IL-3后细胞无法正常增殖,吉非替尼作用后p-EGFR明显下降.结论 成功构建了表达D896N突变型EGFR的Ba/F3细胞株,初步判断该位点并非驱动基因,但是对吉非替尼有一定敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘跃银	安徽医科大学第一附属医院肿瘤科	48	228	9.0	12.0
2	潘婧	安徽医科大学第一附属医院肿瘤科	1	1	1.0	1.0