CRISPR/Cas9技术敲除人前列腺癌PC-3细胞BLM解旋酶基因的研究

• 作者: 吴萍 段志强 许厚强 赵佳福 陈琨
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: BLM解旋酶基因 CRISPR/Cas9表达载体 基因敲除 前列腺癌PC-3细胞
• 年，卷（期）: 2018,（9）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1547-1553
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2018.09.0116

摘要

BLM解旋酶是人类RecQ解旋酶家族的重要一员,在DNA的复制、修复、重组、转录、端粒的维持等细胞代谢过程中具有重要的作用.BLM基因与前列腺癌易感性相关,可作为治疗前列腺癌的候选基因.该研究设计了5个Cas9/SgRNA载体,并通过T7E1酶筛选出活性最强的SgRNA3载体,利用脂质体LTX将其与供体载体共同导入前列腺癌PC-3细胞.BLa和Puro抗性筛选及荧光蛋白标记甄别获得带阳性标记的细胞.Western blot及RTq-PCR检测证明,前列腺癌PC-3细胞中的BLM解旋酶基因被成功敲除,为深入研究BLM解旋酶基因在前列腺癌中的作用提供了重要的科学数据.