基于MGB探针法荧光PCR检测手足口病病原的研究

• 作者: 卢秋梅 许先凯 邱鸿杰
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: MGB探针 荧光PCR 手足口病病原
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 124-127
• 页数: 4页
• 分类号: Q503|R373.2
• 字数: 2910字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2018.01.032

摘要

目的 建立一种能同时检测EV71型、CA16型及其它肠道病毒的荧光PCR检测方法,主要用于手足口病病原的快速检测.方法 针对肠道病毒的保守基因设计特异性引物和探针序列,优化荧光RT-PCR反应体系,构建标准的阳性质控模板,建立标准曲线,研究产品的检测限、重复性、特异性;同时对2015年6月份收集的26份阳性样品和10份阴性样品进行检测.结果 试验得到了阳性重组质粒,线性范围在8×102 copics/μl～8×108 copies/μl范围内检测结果良好;优化后肠道病毒EVUN上下游引物和MGB探针浓度分别为0.50,0.50,0.30 μmol/L,RT-PCR反应条件为:42℃30 min,95℃3 min;95℃5 s,60℃35 s,45个循环.检测限达到800 copies/μl,变异系数CV≤5％,重复性好,特异性良好,与其他传染病毒无交叉反应;用该检测方法检测26份临床阳性样本和10份阴性样本,阳性检出率为100％(26/26),阴性检出率为100％(10/10).结论 试验所建立的荧光PCR检测方法,可用于临床对手足口病病原的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱鸿杰		3	10	2.0	3.0
2	许先凯		2	2	1.0	1.0
3	卢秋梅		5	5	2.0	2.0