CAR菌TaqMan MGB探针法实时荧光定量PCR快速检测方法的建立与应用

• 作者: 关伟鸿 岳秉飞 高正琴
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CAR菌 16S rRNA基因 小沟结合物探针 实时荧光定量PCR 快速检测
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 9-13,19
• 页数: 6页
• 分类号: R33
• 字数: 3793字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969.j.issn.1671.7856.2013.008.003

摘要

目的 建立特异、敏感、快速检测CAR菌的TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法.方法 针对CAR菌16S rRNA基因序列设计特异性引物和探针,建立MGB探针荧光定量PCR方法,验证方法的特异性、敏感性和稳定性.对2008～2012年期间采集的1344份临床标本中的CAR菌进行检测,同时进行普通PCR检测作为对照.结果 CAR菌TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法具有高度特异性,与肺炎支原体、侵肺巴斯德菌、支气管鲍特杆菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠埃希菌、肺炎链球菌间无交叉反应,检测灵敏度达2.7拷贝.标准曲线显示各浓度范围内具有良好线性关系,相关系数为0.999,斜率为-3.22,TaqMan MGB探针荧光定量PCR效率为104.432％.对1344份标本进行检测,结果 TaqMan MGB探针荧光定量PCR检出510份CAR菌阳性样本.TaqMan MGB探针荧光定量PCR能够直接从标本中检出CAR菌DNA,检测时间仅为40 min.结论 TaqMan MGB探针荧光定量PCR方法具有可靠、特异、敏感的特点,适用于CAR菌的快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳秉飞		117	385	11.0	14.0
2	高正琴		23	103	5.0	9.0
3	关伟鸿		3	7	2.0	2.0