基于无缝克隆方法构建毛木耳多功能纤维素酶基因农杆菌转化载体

• 作者: 周洁 彭卫红 李小林 甘炳成 谭伟 贾定洪 黄忠乾
• 来源期刊: 西南农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 无缝克隆 多功能纤维素酶 双元表达质粒
• 年，卷（期）: 2018,（11）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源
• 页码范围: 2235-2238
• 页数: 4页
• 分类号: S646.6
• 字数: 1863字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2018.11.004

摘要

[目的]构建毛木耳农杆菌介导转化双元表达载体,为毛木耳后续多功能纤维素酶基因Mfc转化研究奠定基础.[方法]通过EcoR I酶切pPK2质粒并回收大片段,应用实验设计引物分别对扩增毛木耳Gpd启动子、Mfcsg基因、intron、Hpt基因,通过无缝克隆方法,将pPK2质粒大片段与表达序列同源组裴,分别构建农杆菌转化载体pAKMFC、pAKIMFC.[结果]测序验证发现各个元件都已在改造后的载体中进行了正确组装,符合实验预期.[结论]本实验通过毛木耳Gpd启动子、Mfcsg、Hpt潮霉素B抗性基因和终止子组装,构建形成了能够应用于毛木耳农杆菌介导转化的多功能纤维素酶基因双元表达质粒pAKMFC和pAKIMFC,为多功能纤维素酶Mfcsg基因转化增强毛木耳纤维素降解能力奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭卫红	四川省农业科学院土壤肥料研究所	101	1034	17.0	26.0
2	甘炳成	四川省农业科学院土壤肥料研究所	111	927	16.0	23.0
3	谭伟	四川省农业科学院土壤肥料研究所	68	434	11.0	15.0
4	李小林	四川省农业科学院土壤肥料研究所	44	236	9.0	13.0
5	黄忠乾	四川省农业科学院土壤肥料研究所	71	490	12.0	17.0
6	贾定洪	四川省农业科学院土壤肥料研究所	40	308	10.0	15.0
7	周洁	四川省农业科学院土壤肥料研究所	20	90	6.0	9.0