枯草芽孢杆菌纤维素酶基因整合载体的构建

• 作者: 史敦胜 宋洋洋 李旺 王占彬 聂利波
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 同源重组 纤维素酶基因 枯草芽孢杆菌
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 31-36
• 页数: 6页
• 分类号: Q784
• 字数: 4368字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201710006

摘要

目的:以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为宿主,构建纤维素酶基因整合表达载体,获得能够表达纤维素酶并且降解纤维素的工程菌.方法:通过聚合酶链式反应(polymerasc chain reaction,PCR)从B.subtilis LN 基因组中克隆同源片段M1、M2基因片段,以质粒pGEM-T为载体,将同源片段M1、M2、启动子P43和葡萄糖苷酶基因CelKg连接在一起构建整合载体pGEM-Kmpgmt,并采用双交换同源重组的方式将其转化进入B.subtilis LN 基因组中.结果:通过PCR和双酶切验证整合载体构建完成,并成功整合到野生型B.subtilis LN中,获得重组菌B.subalis Kpg.刚果红染色结果显示重组菌对羧甲基纤维素钠有降解作用.改良培养基37℃条件下摇瓶培养,重组菌B.subtilis Kpg生长至18h时上清液中纤维素酶活力比野生型B.subtilisLN提高了115％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王占彬	河南科技大学动物科技学院	135	668	12.0	20.0
2	李旺	河南科技大学动物科技学院	62	170	6.0	10.0
3	聂利波	河南科技大学动物科技学院	6	13	3.0	3.0
4	史敦胜	河南科技大学动物科技学院	9	19	3.0	3.0
5	宋洋洋	河南科技大学动物科技学院	7	13	3.0	3.0