敲除BMAL1基因促进HL-60细胞凋亡并抑制增殖

• 作者: 倪庆仁 刘明莉 宋艳萍 张韵洁 戴进前 温静 牟佼
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CRISPR/Cas9 BMAL1 基因敲除 急性髓系白血病
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 抗白血病基础与临床
• 页码范围: 1027-1032
• 页数: 6页
• 分类号: R733.71
• 字数: 3605字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7534/j.issn.1009-2137.2018.04.014

摘要

目的:运用CRISPR/Cas9技术敲除节律基因BMAL1的HL-60细胞系,探讨BMAL1分子在人急性髓系白血病中的生物学功能.方法:针对BMAL1基因设计2条sgRNA,构建含有sgRNA的PX459敲除载体;应用T7核酸内切酶I检测设计的sgRNA活性;应用打靶载体瞬时转染HL-60细胞构建BMAL1敲除细胞系,应用Western blot检测BMAL1蛋白的表达,应用流式细胞仪检测敲除细胞系的凋亡水平,应用CCK-8试剂盒检测敲除细胞系的增殖能力.结果:成功构建了针对BMAL1的PX459-sgRNA载体;并筛选得到了活性较高的打靶载体.Western blot实验在敲除细胞中未检测到BMAL1蛋白的表达.进一步实验发现,BMAL1敲除的HL-60细胞凋亡水平明显升高,细胞增殖能力明显减弱.结论:利用CRISPR/Cas9技术成功构建了BMAL1基因敲除的HL-60细胞系,并发现BMAL1敲除可以促进HL-60细胞的凋亡,抑制肿瘤细胞的增殖,初步揭示了BMAL1生物节律基因在急性髓系白血病中的生物学作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋艳萍	西安市中心医院血液病研究所	30	125	7.0	9.0
2	倪庆仁	西安市中心医院血液病研究所	10	31	3.0	5.0
3	张韵洁	西安市中心医院血液病研究所	5	23	3.0	4.0
4	牟佼	西安市中心医院血液病研究所	11	15	3.0	3.0
5	戴进前	西安市中心医院血液病研究所	6	7	2.0	2.0
6	刘明莉	宝鸡市第二中医医院呼吸内分泌科	3	9	2.0	3.0
7	温静	西安市中心医院血液病研究所	1	3	1.0	1.0