抗人TIM-3单克隆抗体的纯化及其体外生物学功能的研究

• 作者: 卢斌峰 孙润孜 岳翠华 蒋敬庭 陈建新
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 免疫卡控点 抗体纯化 TIM-3 T细胞
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 375-379
• 页数: 5页
• 分类号: R-392.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2018.05.15

摘要

目的 纯化抗人T细胞免疫球蛋白粘蛋白3(TIM-3)单克隆抗体4E8,检测TIM-3单克隆抗体4E8的体外生物学功能.方法 利用单克隆抗体纯化技术获取4E8;用细胞转染技术获得表达人TIM-3分子的细胞系,流式细胞术检测4E8与人TIM-3分子结合的能力以及阻断人TIM-3融合蛋白(TIM-3 Ig-huFc)与凋亡细胞表面TIM-3配体磷脂酰丝氨酸(PtdSer)结合的能力;混合淋巴细胞反应(MLR)及ELISA法检测4E8对CD4+T细胞分泌IFN-γ的影响.结果 4E8可与人TIM-3分子结合,但不可阻断TIM-3与PtdSer的结合.与阴性对照组(958.3±153.2)相比,4E8(10μg/mL组:2563±150.3,3.33μg/mL组:1981±211.5)可增强MLR实验中CD4+T细胞分泌IFN-γ的能力,差异有统计学意义(P<0.05).并且与单独使用4E8(10μg/mL组:1981±211.5,0.33μg/mL组:844±76.2)相比,4E8与程序性死亡受体1(PD-1)抗体nivolumab联合使用(10μg/mL组:3049±80.5,0.33μg/mL组:1957±321.3)有协同作用,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功纯化出抗人TIM-3单克隆抗体4E8.4E8具有增强CD4+T细胞分泌IFN-γ的能力,但对CD4+T细胞的作用不依赖于阻断TIM-3与其配体PtdSer的结合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋敬庭		19	30	3.0	4.0
2	卢斌峰	苏州大学附属第三医院肿瘤生物诊疗中心	5	17	2.0	4.0
3	岳翠华		2	3	1.0	1.0
4	孙润孜		1	0	0.0	0.0
5	陈建新		1	0	0.0	0.0